去窦弓神经大鼠视交叉上核钟基因的表达模式
作者:李慧 出处:北京大学人民医院
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目的:哺乳动物日常行为和生理过程的昼夜节律受机体生物钟的调控,主要的生物钟定位于下丘脑视交叉上核(SCN),钟基因呈现节律性表达。血压、心率和心输出量等心血管功能指标均呈现昼夜节律性变化,而且异常的血压波动模式是心脑血管疾病的高危因素。去窦弓神经(SAD)动物血压波动性明显增大而血压水平正常,与靶器官损害的发生及严重程度有关。研究SAD大鼠钟基因的昼夜表达特性,探讨正常血压水平的血压异常波动与基因表达和器官损害之间的关系。 方法:取36只12周龄雄性Sprague Dawley大鼠,麻醉下行去窦弓神经手术,切断两侧主动脉神经,清除颈动脉窦区域的神经支配,并用10%的苯酚溶液涂抹局部。同时制备假手术大鼠作为对照。术后4周,将实验动物置于12小时光照/12小时黑暗交替的环境中饲养10天。从光照开始(zeitgeber time[ZT]0)每4小时取材一次,分别从核酸和蛋白质水平检测下丘脑SCN组织中钟基因的表达情况,即采用半定量反转录聚合酶链反应(RT PCR)技术检测钟基因—per2和BMAL1 mRNA的表达,采用免疫组织化学染色方法检测per2基因产物—PER2蛋白的表达。 结果:钟基因在SAD和假手术大鼠下丘脑SCN组织中昼夜表达的节律基本同步。per2 mRNA的转录均呈现明显的昼夜波动,光照—黑暗交替时(ZT12)转录水平较高,光照初期(ZT0~4)转录水平较低;BMAL1 mRNA的表达于黑暗初期(ZT16)达到峰值,光照后期(ZT8)降至最低。SAD大鼠钟基因昼夜表达的节律性减
发布人:onetwofree 发布时间:2005年9月23日
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