探讨心肌样细胞内游离钙离子浓度的变化
作者:王勃 出处:中国医科大学附属第一临床学院
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目的：研究起源于骨髓间充质干细胞的心肌样细胞，在L型钙通道阻滞剂、内皮素影响下，游离钙离子浓度的变化，进一步明确心肌样细胞的电生理特性。 方法：①采用黏附贴壁的方法,体外培养Wistar大鼠骨髓间充质干细胞; 使用分次胰蛋白酶消化的方法原代培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞；②10 μmol/L浓度的5-氮胞苷诱导第一代骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化；③通过免疫细胞化学染色的方法鉴定骨髓间充质干细胞与心肌样细胞; ④本实验分为3组：A组：培养至4周的第1代骨髓间充质干细胞；B组：诱导后培养至4周的第1代骨髓间充质干细胞，即心肌样细胞；C组：心肌细胞；⑤使用细胞内钙离子荧光成像测定系统，测定在L型钙通道阻制剂、内皮素作用下，骨髓间充质干细胞、心肌样细胞与心肌细胞内游离钙离子浓度的变化。 结果：①通过多次胰酶消化方法，成功建立了心肌细胞的体外培养；②骨髓间充质干细胞表达CD44、CD90，不表达CD34；③心肌样细胞表达心肌特异蛋白：肌钙蛋白T与α肌节肌动蛋白；④骨髓间充质干细胞内游离钙离子浓度对L型钙通道阻制剂—异搏定的作用无变化，而心肌样细胞在加入异搏定后，细胞内游离钙离子浓度逐渐下降，与心肌细胞内游离钙离子浓度的变化趋势大体相同；⑤给予内皮素后，骨髓间充质干细胞内钙离子荧光强度无变化，而心肌样细胞与心肌细胞则随着干预时间的延长，荧光强度逐渐增强，但心肌细胞增加的程度明显大于心肌样细胞。 结论：由体外培养的骨髓间充质干细胞诱导分化而来的心肌样细胞，在L型钙通道阻制剂或内皮素的作用下，与来源于同一种系的心肌细胞，表现出相同的细胞
发布人:onetwofree 发布时间:2005年9月23日
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