糖尿病肾病以系膜基质积聚为主要病理特征,系膜基质的含量与成分依赖于系膜细胞基质合 成与降解的精细平衡。在STZ诱导的糖尿病大鼠中已发现C肽长期应用能预防糖尿病大鼠肾小 球系膜基质积聚导致的系膜扩张和肾小球肥大。
目的 本实验应用体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞研究C肽对IV型胶原和MM P-2表达的作用,了解C肽对系膜细胞基质合成与降解的影响。
方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞布满瓶底时,给予无血清培养液培养24h 同步化。然后 分别给予三种条件培养48h:正常葡萄糖浓度(10 mmol/L)培养液(NG组);高葡萄糖浓 度(30 mmol/L)培养液(HG组);高葡萄糖浓度(30 mmol/L)加C肽(300 nmol/L)培养 液(HG-C组)。实验结束时应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞IV型胶原和MM P-2 mRNA的表达;应用ELISA法测定培养液IV型胶原蛋白含量和MMP-2活性。
结果 HG组IV型胶原mRNA表达量(82(14)(10-2明显高于NG组(63(3)(10-2( P=0.007); 加用C肽的HG-C组IV型胶原mRNA表达量(54(11)(10-2达到NG组水平,明显低于HG组(P<0 .0 01)。HG组MMP-2 mRNA表达量(59(3)(10-2低于NG组(65(4)(10-2(P=0.027);加用C 肽 的HG-C组MMP-2 mRNA表达量(59(5)(10-2与HG组水平一致,也低于NG组(P=0.036)。HG 组 培养液IV型胶原
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