目的和意义 以往的研究发现2型DM患者确诊之前已存在胰岛素抵抗和高游离脂肪酸血症,以及大血管功能的损害。本研究通过探讨各种游离脂肪酸(FFA),包括软脂酸(PA)、硬脂酸(SA)、油酸(OA)、亚油酸(LA)和花生四烯酸(AA), 以及胰岛素、瘦素和TNFα对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率的影响,旨在探讨胰岛素抵抗状态下血管内皮细胞损伤的可能机制。
方法 (1)应用MTT比色法测定上述五种不同浓度的FFA和其它试剂对人脐静脉 内皮细胞(HUVEC)存活率的影响;(2)用绿色荧光蛋白标记的膜联蛋白Ⅴ/碘化 丙啶(annexin V-GFP/PI)双染色法检测细胞凋亡和死亡。
结果 (1)PA和SA在200μmol/L浓度的情况下处理细胞72h,细胞存活率约 为对照组的45%,这种抑制细胞存活率的作用呈剂量和时间依赖性。100μmol/L的OA处 理细胞48h,无细胞存活。LA对细胞的存活率几乎无影响。AA在2μmol/L时, 处理细胞72h后,细胞存活率增加28%;(2)PA在低浓度和短时间内引起细胞凋亡, 而高浓度和长时间处理细胞则引起细胞死亡;(3)多不饱和脂肪酸中的AA能部分阻 断 PA诱导的HUVEC死亡。
结论 饱和脂肪酸PA和SA以及单不饱和脂肪酸OA对血管内皮细胞有较强的毒性作用,而多不饱和脂肪酸中的AA则能部分阻断PA诱导的血管内皮细胞死亡。 这些结果说明,不仅饱和脂肪酸的浓度,而且饱和脂肪酸和AA的浓度比例对血管内皮细胞的存活率均有重要意义
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